Zamboni固定液操作方法

Zamboni-固定液(Zamboni Fluid)主要由PA、多聚甲醛、磷酸鹽等組成，PA可沉淀蛋白引起組織收縮，但不會使組織硬化, 其與甲醛和乙酸混合后，穿透速度加快，固定均勻，組織收縮輕微，對細胞的微細結(jié)構(gòu)顯示的很清晰，為一種良好的固定液。

說明：固定液分為醛類固定液、汞類固定液、醇類固定液、氧化劑類固定液、苦酸鹽類固定液等，較為常用的是醛類中的福爾馬林、醇類中的乙醇。固定的目的在于保存細胞和組織的原有形態(tài)結(jié)構(gòu)，固定劑能阻止內(nèi)源性溶酶體酶對自身組織和細胞的自溶、抑制細菌和霉菌的生長。

用途：Zamboni-固定液是常用的混合型固定液之一，該固定液適用于電鏡免疫細胞化學，對超微結(jié)構(gòu)的保存較純甲醛為優(yōu)，也適用于光鏡免疫細胞化學的研究。固定時間為6-18小時。

操作步驟:（僅供參考）

1. 按實驗具體要求操作。

2. 一般僅需固定30～60min。如果組織塊大，可適當延長固定時間，但不宜超過24h。

3. 固定后組織可稍微流水沖洗或不沖洗直接轉(zhuǎn)入 70%的乙醇脫水，經(jīng)乙醇脫水時可除去大部分PA，組織留有一點黃色，對染色也無影響。

微波輻射固定組織。

組織固定的結(jié)果是組織中的蛋白質(zhì)凝固，以保存組織中原有的微細結(jié)構(gòu)。常規(guī)固定用的是甲醛或酒精等。但是這些固定劑從某些方面來說其穿透力不很強，因而需要較長時間的固定，另者，臨床上的冰凍切片，有的應(yīng)用快速加熱法預(yù)先固定組織，造成福爾馬林的極度揮發(fā)，污染環(huán)境，影響人們的身體健康，因此尋找其它固定組織的方法就成為研究的重點。微波輻射固定組織，就是在這種情況下產(chǎn)生的。微波是一種具有能量的電磁波，在其運動期間可產(chǎn)生瞬間熱。由于微波的快速運動，也導(dǎo)致了物體部極性分子的快速運動，產(chǎn)生了熱量，致使組織蛋白凝固，因此，舊的叫法稱微輻射固定組織。按實際的應(yīng)稱為微波輻射凝固蛋白。