南京信帆生物推新：血管緊張素2/ANG-2 ELISA試劑盒*!

ANG-2即血管生成素-2，是一個分子量約為70 kDa的分泌型糖蛋白，在血管生成、炎癥和血管發(fā)育中起復雜作用，在高度血管生成組織的血管內皮細胞和平滑肌細胞、肺上皮細胞、分化的肌管、神經祖細胞中表達。ANG-2促進內皮細胞的生存、增殖和遷移，并促進出芽式血管生成，它誘導血管壁周細胞的損失，增加血管通透性。ANG-2對于淋巴管的發(fā)育、淋巴管和血管的后天重塑是*的。

血管肉瘤患者的ANG-2水平是升高的，研究表明，ANG-2參與感染性休克的發(fā)病。血清中ANG-2的表達與多發(fā)性骨髓瘤的生長、血管生成和口腔鱗狀細胞癌的整體存活有關。循環(huán)的ANG-2是慢性透析的兒童早期心血管疾病的一個標志，卡波氏肉瘤相關皰疹病毒引起內皮細胞快速釋放出ANG-2。

人血管緊張素2（ANG-2）ELISA試劑盒檢測步驟

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀 釋。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、

待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl， 然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡 量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此

重復 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同 3。

8. 洗滌：操作同 5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.  終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11.  測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液后 15 分鐘以內進行。