豬透明質酸(HA)檢測試劑盒*！快來訂購吧！

檢測目的
本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關液體樣本中透明質酸(HA)含量。

實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬透明質酸(HA)水平。用純化的豬透明質酸(HA)抗體包
被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入透明質酸(HA)，再與 HRP 標記的透明
質酸(HA)抗 體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。
TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品
中的透明質酸(HA)呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標 準曲
線計算樣品中豬透明質酸(HA)濃度。

操作步驟：

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行
稀釋。
240ng/L  5 號標準品 150µl 的原倍標準品加入  150µl 標準品稀釋液
120ng/L  4 號標準品 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
60ng/L   3 號標準品 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
30ng/L   2 號標準品 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
15ng/L   1 號標準品 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡 量
不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同 3。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白孔調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止 液
后 15 分鐘以內進行

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注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未
用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本 OD 值
大于標準品孔*孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計
算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準. 8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用。

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