髓過氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒測(cè)定原理！

測(cè)定原理：

中性白細(xì)胞中存在有髓過氧化物酶 ，每個(gè)細(xì)胞中所含的酶的量是一定的，約占細(xì)胞干重的 5%，該酶具有使過氧化氫還原的能力，利用這一特點(diǎn)可以分析酶的活力，并定量測(cè)定中性白細(xì)胞的數(shù)目。其原理如下：

MPO+H2O2→復(fù)合物；復(fù)合物+AH2(供氫體) →H2O+MPO+A 產(chǎn)物

通過供氫體鄰連茴香胺供氫后生物試劑黃色化合物，在 460nm 處通過比色測(cè)定 A 產(chǎn)物的生成量，從而推算出 MPO 的活力以及 H2O2 減少的量和白細(xì)胞的數(shù)目。

試劑組成與配制：（100T/48 樣）
試劑一：緩沖貯備液 35ml X 1 瓶，4℃保存 6 個(gè)月
緩沖應(yīng)用液的配制： 貯備液：雙蒸水=1:9，按需要量配制，4℃保存 1 個(gè)月。
試劑二： 粉劑 X2 支，4℃保存 6 個(gè)月。臨用時(shí)每支加緩沖應(yīng)用液 60ml 溶解，可以 37℃加熱溶解，
4℃保存 2 周。
【注】若您所需測(cè)的是組織樣本，并且除髓過氧化物酶之外，還需測(cè)其他項(xiàng)目時(shí)，此時(shí)每支試劑二粉
劑需配成濃縮一倍的溶液，即每支試劑二粉劑加到緩沖應(yīng)用液 30ml 中。
試劑三： 粉劑 X3 支，溶劑 6mlX3 支，4℃保存 6 個(gè)月。用時(shí) 1 支粉劑倒入 1 支溶劑中溶解，
提前一天配制，充分溶解后 4℃保存 2 周。
試劑四：溶液 24mlX1 瓶，天冷時(shí)會(huì)凝固。用前放入 37℃以上的水中搖晃使其溶解至透明后方可應(yīng)
用，室溫保存 6 個(gè)月。
試劑五：粉劑 X2 支，4℃保存 6 個(gè)月。
試劑六：溶液 0.5mlX1 支，4℃保存 6 個(gè)月。
顯色劑的配制：臨用時(shí)將試劑五粉劑 1 支加到 100ml 緩沖應(yīng)用液中，充分搖勻，待粉劑*溶
解后再加入試劑六 0.1ml，充分混勻，配制好的顯色劑 4℃避光保存。
試劑七：溶液 6ml X1 支，4℃保存 6 個(gè)月。

髓過氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒測(cè)定原理！

二．組織樣本的 MPO 測(cè)定
（一）、樣本前處理
1.準(zhǔn)確稱取組織重量，以配制好的試劑二溶液為勻漿介質(zhì)，按重量體積比為 1:19 加勻漿介質(zhì)
制備成 5%的組織勻漿，不需要進(jìn)行離心。
【注】：若您除做髓過氧化物酶之外，還需要測(cè)其他指標(biāo)時(shí)，則組織勻漿制備要按下面方法：

1.試劑二配制時(shí)要濃縮一倍，即每支試劑二粉劑加到 30ml 緩沖應(yīng)用液中；

2.先用生理鹽水為勻漿介質(zhì)按實(shí)驗(yàn)方法學(xué)制成濃縮一倍的勻漿，即 10%勻漿（腦組織制備成 20%勻
漿），不要離心，取出部分濃縮一倍勻漿按 1:1 比例加入濃縮一倍的試劑二溶液，混勻后再進(jìn)行測(cè)定。

3.取 5%組織勻漿 0.9ml 加 3 號(hào)試劑 0.1ml，（如果組織勻漿量不夠，可以按 9:1 的比例減少組織勻漿及 3 號(hào)試劑的用量），充分混勻后 37℃水浴 15 分鐘，取出后待測(cè)。

注 1： 天冷時(shí)，反應(yīng)液會(huì)出現(xiàn)凝固狀態(tài)，吸光度上升，您可以用 25 - 37℃水浴箱或取一個(gè)盛 25 - 37℃熱水的燒杯放在比色機(jī)旁邊，將各待測(cè)管一次放入水浴箱或燒杯中 1 - 2 分鐘，待凝固消失后即可進(jìn)行比色。

注 2：混勻時(shí)，用漩渦混勻器，使液體上下充分混勻（一定要使zui下面液體也能旋轉(zhuǎn)到上面，建議不要用尖底的管子做，尤其不可用 1.5ml 的 EP 管，因?yàn)檫@樣非常難混勻）

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