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小鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)elisa試劑盒*,買(mǎi)二送一!

更新時(shí)間:2018-06-29      瀏覽次數(shù):2988

小鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)elisa 試劑盒*,買(mǎi)二送一!

生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)由下丘腦弓狀核神經(jīng)元合成并釋放入垂體門(mén)脈系統(tǒng)后,與垂體生長(zhǎng)激素細(xì)胞表面的生長(zhǎng)激素釋放激素圖冊(cè)生長(zhǎng)激素釋放激素受體(GHRHR)結(jié)合后,活化非選擇性離子通道,使細(xì)胞膜去極化,促進(jìn)鈣離子內(nèi)流和GH分泌.本藥盒利用人血清中樣品GHRH與其示蹤物125I-GHRH與特異性GHRH抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合反應(yīng),形成125I-GHRH-GHRHAb;GHRH-GHRHAb復(fù)合物,加入(IgG)分離劑。利用分離劑分離出復(fù)合物,并測(cè)定復(fù)合物中的放射性計(jì)數(shù)。通過(guò)數(shù)據(jù)處理求出樣品中GHRH的濃度。本藥盒為定性測(cè)定,用血量少,直接加樣,操作簡(jiǎn)便,快速。

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實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)水平。用純化的小鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH),再與HRP標(biāo)記的促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)抗 體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過(guò)標(biāo) 準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠促生長(zhǎng)激素釋放激素(GHRH)濃度。

操作步驟:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
48ug/L    5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
24ug/L    4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12ug/L    3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6ug/L    2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3ug/L    1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品    150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl, 然后再加待測(cè)樣品 10µl(樣品終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡 量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

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4.配液:將 2 0 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 2 0 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
     10 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白孔調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

相關(guān)產(chǎn)品如下:

人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA Kit
人B-Raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(BRAF)ELISA試劑盒
小鼠TANK結(jié)合激酶1(TBK1)ELISA試劑盒
人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白(N-Cad)ELISA Kit 
人C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(C1QTNF1)ELISA試劑盒
人白介素3(IL-3)ELISA Kit
小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA Kit
小鼠AMP活化的蛋白激酶N1(PRKAa1)ELISA試劑盒
人白介素12 p35(IL-12 p35)ELISA試劑盒
小鼠BCL-2相關(guān)X蛋白(Bax)ELISA試劑盒
人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA Kit
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA Kit 
小鼠Toll樣受體2(TLR-2/CD282)ELISA試劑盒 
人apelin 13(AP13)ELISA Kit 
小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA Kit
人Janus激酶1(JAK1)ELISA試劑盒 
人I型前膠原氨基端原肽(PINP)ELISA試劑盒
人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA Kit
人MAX二聚化蛋白1(mxd1)ELISA Kit
人BTG3關(guān)聯(lián)核蛋白(BANP)ELISA試劑盒
小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl-3)ELISA試劑盒
人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA Kit
人17羥孕酮(17-OHP)ELISA Kit
小鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA Kit
人REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)ELISA Kit
人ADAM金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA Kit
小鼠apelin 12(AP12)ELISA Kit

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