Poly（A）聚合酶操作方法！

PolyA 聚合酶為加A聚合酶，該酶以RNA為模板在RNA的3′末端加入20~200個(gè)A堿基?？蓱?yīng)用于增強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性，及microRNA加A尾，為cDNA合成提供oligo-dT引物結(jié)合位點(diǎn)等。信帆生物生物試劑的PolyA聚合酶是E.coli來(lái)源的，該酶是以單鏈RNA 作為模板，ATP作為底物進(jìn)行聚合反應(yīng)的。

組分

組分名稱                                      數(shù)量

Poly(A) Polymerase(5U/μl)      20 μl /200 μl

10XEPAP Reaction Buffer           500 μl

10 mM ATP                             100 μl/500 μl

25 mM MnCl2                            500 μl

來(lái)源

重組表達(dá)的E.coli來(lái)源的Poly(A)聚合酶。

單位定義

在37℃、pH7.9 的條件下，以ATP 為底物，10 分鐘內(nèi)把1 nmol的AMP 聚合到RNA上所需要的酶量定義為1個(gè)活性單位（U）。

應(yīng)用

RNA 3' 標(biāo)記增強(qiáng)RNA穩(wěn)定性microRNA加A尾，為cDNA合成提供oligo-dT引物結(jié)合位點(diǎn)

儲(chǔ)存

-20°C可保存2年。

Poly（A）聚合酶操作方法！