SP檢測(cè)試劑盒適應(yīng)多種實(shí)驗(yàn)，不信過(guò)來(lái)看看

本試劑盒適合于一抗為小鼠/兔 IgG 的免疫組化實(shí)驗(yàn) DAB 顯色。SP 試劑盒是專為免疫組化和其他免疫檢測(cè)而設(shè)計(jì)的，用以顯示組織和細(xì)胞中抗原分布。鏈霉親和素(StreptAvidin)是一種從鏈霉菌中提取的蛋白質(zhì)，同親和素一樣，對(duì)生物素有*的親和力，親和素是一個(gè)堿性蛋白質(zhì)（PI=10），經(jīng)改造后可以轉(zhuǎn)變成中性蛋白質(zhì)。鏈霉親和素等電點(diǎn)接近中性，對(duì)組織和細(xì)胞的非特異吸附很低，因此基于鏈霉親和素的免疫組化方法背景很低。

操作步驟:（以石蠟切片為例） 
1. 切片常規(guī)脫蠟至水(三次二甲苯，三次乙醇)。

2. 3% H2O2 室溫處理 5-10 分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗 3 次。

3.可選步聚：
a、熱修復(fù)抗原，將切片浸入 0.01M 檸檬酸鈉緩沖液（PH6.0），電爐或微波爐加熱至沸騰后斷電，間隔 5-10 分鐘后，反復(fù) 1-2 次。冷卻后 PBS（pH7.2-7.6）洗滌 1-2 次。
b、酶消化，滴加消化液，37℃10 分鐘，PBS（pH7.2-7.4）洗滌 2-3 次。
c、跳過(guò)此步，直接進(jìn)入下一步。

4. 滴加封閉液，室溫 20 分鐘。甩去多余液體，免洗。

5. 用稀釋液將一抗按一定比例稀釋（稀釋后的一抗 4℃可保存一周），也可另行購(gòu)買抗體稀釋液。滴加稀釋的一抗 37℃ 孵育 1 小時(shí)左右或 20℃ 2 小時(shí)左右，也可 4℃過(guò)夜。PBS（pH7.2-7.4）洗滌 3次，每次 2 分鐘。（一抗的稀釋度、孵育時(shí)間和溫度與染色強(qiáng)度、背景有直接關(guān)系。一般來(lái)說(shuō)，陽(yáng)性染色強(qiáng)度不夠時(shí)，可提高一抗?jié)舛群脱娱L(zhǎng)孵育時(shí)間；背景過(guò)高時(shí)，可降低一抗?jié)舛群涂s短孵育時(shí)間。）

6． 根據(jù)用量，用稀釋液將 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10ul Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 濃縮液混勻，此工作液 4℃可保存一周)。滴加 Bio-羊抗小鼠/兔 IgG 工作液，20-37℃ 孵育 30 分鐘。PBS（pH7.2-7.4）洗滌 3 次，每次 2 分鐘。

7．根據(jù)使用量，用稀釋液將鏈酶親和素-POD 濃縮液按 1:100 稀釋成工作液(1ml 稀釋液加入 10ul鏈酶親和素-POD 濃縮液混勻，此工作液 4℃可保存一周)。滴加鏈酶親和素-POD 工液，20-37℃，30 分鐘。PBS （pH7.2-7.4）洗滌 4 次，每次 5 分鐘。

8．DAB 顯色：根據(jù)用量，用 PBS（pH7.2-7.4）配制，按 1ml PBS 加入 50ul 20×DAB 顯色液 A，加入 50ul 20×DAB 顯色液 B 。充分混勻后滴加到切片上。室溫顯色，鏡下控制反應(yīng)時(shí)間，一般在 5-30分鐘之間。蒸餾水洗滌終止反應(yīng)。

9．蘇木素輕度復(fù)染。脫水，透明，封片。顯微鏡觀察。對(duì)于細(xì)胞爬片，固定后，PBS 漂洗兩次，再用 0.5% Triton X-100 室溫孵育 20 分鐘，PBS 漂洗兩次，3% H2O2 處理 15 分鐘；PBS 漂洗兩次，接上述第 4 步。對(duì)于冰凍切片，固定后，PBS 漂洗兩次，接上述第二步。

信帆生物公司主要代理產(chǎn)品：
ELISA試劑盒：進(jìn)口ELISA試劑盒,國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒，大鼠ELISA試劑盒，小鼠ELISA試劑盒等。
培養(yǎng)基：微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。
血清：胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清，NQBB,Hyclone，Gbico原裝血清 。
生物試劑：Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。

標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品：進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.
抗體：一抗,二抗，流式抗體等。
酶免檢測(cè)服務(wù)：進(jìn)口酶免檢測(cè)服務(wù)，國(guó)產(chǎn)酶免檢測(cè)服務(wù)，進(jìn)口美國(guó)鳳凰等酶免檢測(cè)服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)室代測(cè)服務(wù)：酶免代測(cè)，WB實(shí)驗(yàn)，免疫組化代測(cè)，熒光定量PCR代測(cè)，病理細(xì)胞染色代測(cè)，生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)等。