信帆生物細(xì)胞涂片固定液-細(xì)胞涂片常用的固定液

在氣液色譜和液液色譜中作為固定相的液體稱為固定液。在氣液色譜中，這種液體固定相又稱為液相(liquid phase)。

規(guī)格：500ml
保存：室溫,
有效期：12個(gè)月
用途：細(xì)胞涂片常用的固定液，滲透力強(qiáng)，可加快細(xì)胞的固定。
說(shuō)明：主要由乙醇、YM組成,主要用于細(xì)胞涂片固定，滲透力強(qiáng)，可加快細(xì)胞的固定。

固定液的要求：1、揮發(fā)性小，操作溫度下有較低蒸氣壓，以免流失
2、熱穩(wěn)定性好，操作溫度下不發(fā)生分解和聚合反應(yīng)，并且液體狀態(tài)，保持固定液原來(lái)的特性
3、對(duì)試樣有一定的溶解能力，以免被測(cè)組分被帶走起不到分配作用
4、具有良好的選擇性，即操作條件下，對(duì)沸點(diǎn)相近或者性質(zhì)相似的不同物質(zhì)有盡可能高的分離能力

培養(yǎng)細(xì)胞常用固定劑有4％多聚甲醛磷酸緩沖液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃預(yù)熱的PBS輕洗細(xì)胞。
1．4％多聚甲醛磷酸緩沖液 固定10―20分鐘，干燥。
2．甲醇 10‰甲醇固定5―20分鐘，自然干燥。
3．丙酮 4℃冷丙酮固定組織穿透性和脫水性強(qiáng)，抗原保存好，很少用于組織切片，常用于培養(yǎng)細(xì)胞和細(xì)胞涂片的固定，平時(shí)丙酮4℃低溫保存?zhèn)溆?，臨用時(shí)，將載玻片插入冷丙酮內(nèi)5～10分鐘，取出后自然于燥。
4．乙醇 95％乙醇脫水性強(qiáng)，易引起組織收縮、變硬，影響切片質(zhì)量，因而固定時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)(2小時(shí)內(nèi))。乙醇使蛋白變性程度輕，固定后蛋白可再溶解，在染色中孵育時(shí)間長(zhǎng)的情況下，抗原可流失，并減弱反應(yīng)強(qiáng)度。
5．乙mi 與乙醇等量混合對(duì)組織穿透性*，即使涂片上含較多的黏液，固定效果仍較好，是理想的細(xì)胞固定液。
培養(yǎng)細(xì)胞固定之后晾干可使細(xì)胞牢固地黏附在載玻片上，故對(duì)于容易脫落的細(xì)胞應(yīng)延長(zhǎng)晾干時(shí)間。晾干之后PBS漂洗3次，然后進(jìn)行組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)染色。
用于免疫組織化學(xué)的固定劑種類很多，不同的抗原和標(biāo)本均可選醛類固定液，如效果不佳，再試用其他固定液。選擇固定液的標(biāo)準(zhǔn)：一是能保持組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)；二是大限度地保存抗原免疫活性和被檢物不被丟失。一些含重金屬固定液可用于組織化學(xué)標(biāo)本的固定，但在免疫組織化學(xué)染色中禁用。