凍干質(zhì)控菌種培養(yǎng)條件和保存方法

微生物檢測(cè)凍干質(zhì)控菌種白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株使用說(shuō)明書

　　1 復(fù)蘇菌種前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長(zhǎng)的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備，所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護(hù)及無(wú)菌條件下進(jìn)行。

　　2 啟開菌種前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無(wú)菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開塑蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞，加入0.3mL左右的配套液體培養(yǎng)基，用無(wú)菌滴管反復(fù)吹吸，將凍干菌種溶解成為懸液，然后用無(wú)菌滴管或接種環(huán)移至斜面、平板或液體培養(yǎng)基，并連同剩余菌懸液的西林瓶一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(菌種與培養(yǎng)和保存方法對(duì)應(yīng)表見附表1，培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法和傳代保存方法見附表2)。

　　3 次日觀察菌種的生長(zhǎng)情況，如未生長(zhǎng)，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)24h，或吸取培養(yǎng)之后的菌懸液中再次接種培養(yǎng)基，培養(yǎng)24h觀察。

　　4 菌株為一次性使用品，開啟之后不能反復(fù)使用或保存，暫不開啟的菌種應(yīng)在4℃保藏。

　　5 復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用，建議菌種使用5代后棄用。

　　注)：購(gòu)買后請(qǐng)盡量及時(shí)使用凍干菌種，如發(fā)現(xiàn)菌種不活或污染等情況，請(qǐng)?jiān)谫?gòu)買之日起1個(gè)月內(nèi)與我們。

　　凍干菌種白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)蘇示意圖：

培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件和保存方法

　　方法1：

　　無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于營(yíng)養(yǎng)瓊脂(022020)斜面上35-37℃劃線培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于4℃冰箱保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。

　　方法2：

　　無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于營(yíng)養(yǎng)瓊脂(022020)斜面上劃線35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。

　　方法3：

　　無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于血平板(024070)后涂布，35-37℃培養(yǎng)24-48h。平板(*代)放于4℃冰箱保存，并用封口膜或其它封條密封平板，每半個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。

　　方法4：

　　無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)(026020)斜面上 35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于4℃冰箱保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。

　　方法5：

　　無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤肽X心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于皰肉牛肉粒肉湯(027140)加液體石蠟1cm,35-37℃培養(yǎng)48-72h。肉湯(*代)放于4℃冰箱環(huán)境下保存，每半個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。

　　方法6：

　　無(wú)菌條件下，用無(wú)菌吸管往西林瓶?jī)龈删壑屑尤雺A性蛋白胨水，充分懸浮后取適量的菌懸液于堿性瓊脂(025040)斜面上35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存，每個(gè)月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過(guò)5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。

相關(guān)質(zhì)控菌種產(chǎn)品：

鼠傷寒沙門氏菌 ATCC14028

傷寒沙門氏菌 CMCC(B)50071

大腸埃希氏菌O157:H7 NCTC12900

大腸埃希氏菌 ATCC8099

大腸埃希氏菌 CMCC(B)44103

大腸埃希氏菌CMCC(B)44102

大腸埃希氏菌 ATCC25922

大腸埃希氏菌 ATCC8739

銅綠假單胞菌CMCC(B)10104

銅綠假單胞菌 ATCC15442

銅綠假單胞菌 ATCC27853

銅綠假單胞菌 ATCC9027

乙型溶血性鏈球菌 ATCC21059

糞腸球菌（糞鏈球菌） ATCC29212

表皮葡萄球菌 CMCC(B)26069

藤黃微球菌 CMCC(B)28001

金黃色葡萄球菌 CMCC(B)26003

金黃色葡萄球菌 ATCC25923

金黃色葡萄球菌 ATCC6538

釀酒酵母 ATCC9763

肺炎克雷伯氏菌 CMCC(B)46117

肺炎克雷伯氏菌 廣臨檢-57

阪崎腸桿菌ATCC29544

痢疾志賀氏菌CMCC(B)51105

宋內(nèi)志賀氏菌CMCC(B)51592

福氏志賀氏菌CMCC(B)51572

白色念珠菌CMCC(F)98001

白色念珠菌ATCC10231

繩狀青霉GIM3.104

桔青霉菌種AS3.2788

黑曲霉CMCC(F)98003

黑曲霉ATCC16404