α-葡萄糖苷酶（α-GC）檢測試劑盒五一*

測定意義：α-GC(EC 3.2.1.20)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，催化水解芳基或烴基與糖基之間的α-糖苷鍵生成葡萄糖，不僅與細胞壁的松弛或加固有關，而且與細胞識別和一些信號分子產(chǎn)生密切相關。

根據(jù)國際生化聯(lián)合會(IVB)采納的酶學委會(EC)提出的系統(tǒng)命名及系統(tǒng)分類將酶分為6大類：氧化還原酶、轉(zhuǎn)移酶、裂合酶、異構(gòu)酶、水解酶。α-葡萄糖苷酶為水解酶的一種。測定酶類是臨床生化檢驗中常做的項目之一。

測定原理：α-GC分解對-硝基苯-α-D吡喃葡萄糖苷生成對-硝基苯酚，后者在400nm有大吸收峰，通過測定吸光值升高速率來計算α-GC活性。

需要的儀器，耗材:可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

 注意：實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者
增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰
和蒸餾水。
操作步驟：
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
細菌或培養(yǎng)細胞的處理：收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照每 1000 萬細菌或細胞加入 1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞（功率 20%，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復 30 次），15000g，4℃，離心 20min，取上清，置冰上待測。組織的處理：稱取約 0.2g 組織，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿；15000g，4℃，離心 20min，取上清，置冰上待測。